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发布日期:2020-04-15     来源:易丝帮
 

DOI:10.1016/j.msec.2020.110917

备用药剂向口腔粘膜的递送提供了一系列潜在的应用,包括在线治疗抗药性感染的抗菌肽,在线组织再生的生长因子,或作为在线全身递送的注射剂的替代物。针对该部位的现有制剂通常是非特异性的,并且几乎不能控制剂量。为了解决这个问题,赞助了官方国际双层粘膜粘附补片,在线将蛋白递送到口腔粘膜。溶菌酶用作模型抗菌蛋白,并通过乙醇/水混合物的棋牌APP将其掺入到聚(在线基吡咯烷酮)/Eudragit RS100聚合物手机APP中。所得APP膜以临床期望的速率释放蛋白质,2小时后累积释放达到90±13%。双荧光APP标记和共聚焦显微镜证实了溶菌酶和聚合物分布的均一性。实现了高包封效率和酶活性的保留(分别为93.4±7.0%和96.1±3.3%)。释放的溶菌酶抑制了口腔细菌鼠链球菌的生长,提供了保留备用活性的进一步证据,并说明了在治疗和预防口腔感染中的潜在应用。引入了附加的保护性聚(己内酯)背衬层,以促进单向递送,而不会损失酶活性,并且通过体外试验,所形成的双层补片显示出较长的停留时间,这说明其粘合性能得以保持。这项赞助表明,药物递送系统具有将治疗性蛋白质递送至口腔粘膜的巨大潜力。

 

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图1.包含溶菌酶和以乙醇与水的不同混合物作为溶剂和安慰剂(P)的棋牌APP溶液在不含溶菌酶的97 v/v%乙醇中的电导率(A)。以5 s-1的剪切速率测量的棋牌APP溶液的粘度(B)。数据以3个独立重复下载的平均值±标准偏差表示,使用单向ANOVA和事后Tukey测试进行分析。 *,p<0.05; **,p<0.01; ***,p<0.001。


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图2.使用不同浓度乙醇在线的含有溶菌酶的安慰剂膜(a)和国际APP的扫描电子显微照片,左下方显示为v/v%(B-E)。APP直径分布(F)。数据表示为中位数,四分位数范围,以及每种溶剂混合物在线的3个独立样品和每个样品的10个直径测量值的范围,使用单向ANOVA和事后Tukey测试进行分析。*,p<0.05;***,p<0.001。


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图3.使用不同浓度乙醇在线的含溶菌酶的国际APP和安慰剂膜(P)在水中的溶胀度。数据以3个独立样本的平均值±标准偏差表示,使用单向ANOVA和事后Tukey测试进行了分析。对于60 v/v%乙醇,只能进行2次相关测量,因此未计算标准偏差。


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图4.使用乙醇和水的不同混合物作为溶剂的国际APP的包封率和溶菌酶活性。数据以平均值±标准偏差表示,每种溶剂混合物含3个独立样品,使用单向ANOVA和事后Tukey测试进行分析。


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图5.包含FITC-PVP复合物和德克萨斯红色共轭溶菌酶的国际APP的共聚焦显微照片,显示了APP内PVP(A,绿色)和溶菌酶(B,红色)的分布以及两种分布的重叠(C)。用97 v/v%乙醇(D)国际的含溶菌酶膜的包封效率(EE)以及中心、中间和外部区域的活性。数据以平均值±标准偏差表示,每个区域有3个独立样本,使用单向ANOVA和事后Tukey测试进行分析。(要解释该图例中对颜色的引用,请参阅本文的网络版本。)


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图6.浸入PBS后,使用97 v/v%乙醇作为溶剂在线的国际膜上的溶菌酶累积释放。数据表示为平均值±标准偏差,每个时间点有3个独立的样本。


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图7.热处理后形成的连续PCL背衬层薄膜的SEM显微照片(A)和补片的边缘,显示了PCL膜背衬层和含溶菌酶的PVP和RS100APP的下层(B)。在65℃熔化15分钟(C)之前和之后,从具有PCL背衬层的补片中释放的溶菌酶活性。数据以3个独立样本的平均值±标准偏差表示,并使用Welch's t-检验进行分析。


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图8.在PBS、安慰剂膜洗脱液(P)、溶菌酶膜洗脱液(LP)、含安慰剂膜洗脱液的溶菌酶原液(P+L)和溶菌酶原液(L)(a)存在下,通过600 nm处的光密度随时间测量鼠链球菌的生长曲线。相对于PBS在15 h的生长抑制率(B)。数据以3个独立样本的平均值±标准偏差表示,使用单向ANOVA和事后Tukey测试分析15 h时的光密度。****,p<0.0001。

 


 
 
 

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